l 仪器介绍
AXIMA-CFR基质辅助激光离子化飞行时间质谱仪由激光源、机械泵、分子泵、分行管、高压电极、检测器、反射检测器及其它辅助设备和电路控制系统等组成。具有高分辨率、高灵敏度及高精度,且可以根据CFR进行PSD分析。主要用于蛋白质、核酸鉴定及脂肪成分确定。
l 仪器性能
质量范围:线性:1-500kDa
反射:1-60kDa
质量分辨率:线性:胰岛素B链质量分辨率>4000fwhm
反射:胰岛素质量分辨率>20000fwhm
精确度:线性:应用内标时<100ppm
反射:应用内标时<10ppm
MS/MS:用Angiotension进行模拟二级质谱其子离子质量误差小于母离子的0.02%。
l 操作规程
1.接电源打开总开关。
2.启动质谱软件。
3.pump抽真空。
4.打开分子泵,抽真空2-3天,待仪器正常运行。
5.点样、将含基质样品置于金属靶板上。
6.依据放置的靶板选择合适的靶板文件。
7.设定谱峰处理参数:谱峰除杂参数(peak cleanup)、单同位素谱峰选择参数(monoisotopic peak picking)、谱峰滤过参数(peak filtering)、谱峰加工参数(peak processing)
8.点击“应用”(apply)
9.设定实验技术参数
10.协调模式,操作模式,质量范围,最大激光重复数,CID(气体碰撞诱导破碎)
11.设定激光照射参数:自动质量,能量,峰谱,照射次数,离子门,脉冲提取,谱峰累加。
12.启动激光“打靶”样品。
13.根据谱图调整激光照射参数,使谱图稳定,提取肽质量指纹图谱质量列表上网比对,确定蛋白质。
14.检测完后,先关软件主窗口,再关质谱总电源。